说明: 细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)，增强型【产品编码】210817/210818 【包装规格】 产品组成210818/500T210818/1000TCCK-8 增强型溶液5ml 10ml 说明书 1份 1份 【产品简介】CellCounting Kit-8(简称CCK-8),是种基于WST-8面广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。CCK-8试剂中含有WST-8(化学名:2-(2-甲氣基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基茉基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2日-四唑单钠盐)是种类似于WTT的化合物，它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩臻錯硫酸二甲酯(1-Wethoxy PMS)存在条件下,可以被线粒体内的股氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲珊产物Formazan(参考图1),生成的Forazan数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这特性直接进行细胞增殖和毒性分析,细胞增殖越多越快,则颜色越深:细胞毒性越大，则颜色越浅。 【操作步骤】、制作标准曲线(测定细胞具体数量)制备细胞悬液:细胞计数。K2.接种到96孔板中:按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比释成个细胞浓度梯度，般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个重复孔。每孔100L细胞悬液。3.37℃培养箱中培养:细胞接种后贴大约要培养2-4小时,如果不要贴这步可以省去。4.每孔加入10HLCCK-8增强型溶液:由于每孔加入CCK-8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁带来误差,建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混,或者直接配制含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。注意不要在孔中生成气泡,以免彤响吸光摩的检测5.培养箱内孵育定时间后测定450nm吸光度,制作出条以细胞数量为横坐标(X轴)，吸光度为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以定出未知品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间)。便捷程度细胞活性检测1、制备细胞悬液:细胞计数。2.接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔100HL细胞悬液,可设置3个重复孔3.37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约要培养24h小时,如果不要贴壁这步可以省去。也可以根据实验要求的不同,培养相应的时间。4,每孔加入10HL CCK-8增强型溶液由于每孔加入CCK-8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁带来误差,建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混。或者直接配制含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入，注意不要在孔中生成气泡,以免影响吸光度的检测。

说明: 产品特点l 通用广泛，适配主流移液器l 特制滤芯能有效避免吸头在使用过程中因样品挥发形成气溶胶而导致的样品间的交叉污染l 超精密打磨成型技术，内壁光滑，移液精准，密封兼容性更好l 透明度高，刻度清晰，便于观察l 耐受性强，-80℃ ~121℃的耐受范围，高温高压后不变形l 无热原、无内毒素、无 DNase/RNase

说明: 产品特点l 通用广泛，适配主流移液器l 特制滤芯能有效避免吸头在使用过程中因样品挥发形成气溶胶而导致的样品间的交叉污染l 超精密打磨成型技术，内壁光滑，移液精准，密封兼容性更好l 透明度高，刻度清晰，便于观察l 耐受性强，-80℃ ~121℃的耐受范围，高温高压后不变形l 无热原、无内毒素、无 DNase/RNase

说明: 产品特点l 通用广泛，适配主流移液器l 特制滤芯能有效避免吸头在使用过程中因样品挥发形成气溶胶而导致的样品间的交叉污染l 超精密打磨成型技术，内壁光滑，移液精准，密封兼容性更好l 透明度高，刻度清晰，便于观察l 耐受性强，-80℃ ~121℃的耐受范围，高温高压后不变形l 无热原、无内毒素、无 DNase/RNase